english
deutsch
espanol
chinese
japanese
главная о компании новости контакты спецпредложения информация обратная связь ссылки вакансии
Каталог
Статьи
Гистология и цитология
Микроскопы Nikon, системы для телепатологии Aperio
Микробиология
Молекулярная и клеточная биология
Оборудование для моргов Hygeco
Собственное производство
Реклама
Новости
Заливка гистологического материала

Для получения тонких (до 6 мкм) гистологических срезов необходимо фиксированный и промытый материал залить в плотную среду, предварительно пропитав ею кусочки тканей. 

В зависимости от способа растворения все заливочные среды разделяют на растворимые в органических растворителях - парафин и пластические полимеры на его основе, целлоидин, и водорастворимые - желатин, полиэтиленгликоли, полиэфиры, некоторые метакрилаты и т.д.
Для заключения фиксированных объектов в парафин или целлоидин, использующиеся в практике наиболее часто, их предварительно подвергают обезвоживанию при помощи этилового спирта (реже применяют ацетон и другие спирты). Обезвоженные объекты перед заделкой в парафин проводят через промежуточные среды (ксилол, бензол, хлороформ, различные масла).
Из залитых в парафин или целлоидин блоков изготовляют срезы, которые затем окрашивают, обезвоживают, проводят через промежуточные среды и заделывают в канадский бальзам или его заменители (пихтовый бальзам, идитол и др.), если в описаниях специальных методов нет иных указаний.

Заливка в парафин является наиболее широко распространенным методом. Преимуществами методики являются относительная быстрота, возможность приготовлять весьма тонкие срезы (до 1-2 микрон) в виде серии, что особенно важно для гистологических и эмбриологических работ. К недостаткам парафиновой заливки следует отнести некоторое сжатие заливаемого материала (на 8-20%) и необходимость подвергать его действию относительно высокой температуры (56-58 градусов по Цельсию).

Заливка в целлоидин
  может быть рекомендована для трудно режущихся объектов и образцов, чрезмерно затвердевающих при парафиновой заливке (декальцинированная кость, кожа, толстые слои гладкой мускулатуры), а также в тех случаях, когда надо избежать воздействия высокой температуры. получаемые при целлоидиновой заливке срезы можно легко и удобно по отдельности проводить через различные растворы и красители.
Недостатками метода являются его длительность, трудность изготовления серийных срезов, относительную трудность наклейки срезов и большую толщину получаемых срезов в сравнении с парафиновыми. Следует также подчеркнуть, то целлоидиновая заливка требует применения полностью безводных реактивов, а объекты должны быть безукоризненно обезвожены. В настоящее время данный метод используется достаточно редко, поэтому упоминание о нем носит скорее исторический характер.

Заливку в целлоидин применяют:
1.  для объектов, имеющих большие полости и лакуны;
2.  для объектов, имеющих слои различной консистенции (например, членистоногие);
3.  для объектов больших размеров, с которых трудно получить хорошие парафиновые срезы;
4.  для изготовления толстых срезов, необходимых для специальных исследований.

Преимущества обоих способов - целлоидиновой и парафиновой заливки - скомбинированы в целлоидин-парафиновом методе, при котором объект сперва заливается в целлоидин, а затем заключается в парафин.

Заливка в желатин  применяется для рыхлых и легко распадающихся тканей, подготовляемых для резки на крио-микротоме, а также при изучении жировых и липоидных включений, не переносящих действия спиртов, ксилола и т.п. При заливке в желатин происходит минимальное изменение объема объекта, что особо важно при изучении интерцеллюлярных пространств, рыхлой соединительной ткани и т.д.

Использованная литература:
1.  "Микроскопическая техника" под редакцией Саркисова Д.С., М., 1996
2.  Микроскопическая техника под редакцией Роскина Г.И.

Вы можете купить здесь
Заливка
Заливочные станции и модули
Заливочные формы, кассеты, кольца
Заливочные среды
Термостаты
(812) 305-06-06     (495) 787-40-46 главная | о компании | новости | контакты | спецпредложения | информация | обратная связь | ссылки | вакансии
Яндекс цитирования Rambler's Top100 Веб-студия «Силуэт»:
изготовление сайтов